近日，中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶生物技術(shù)研究所蛋白質(zhì)組學(xué)研究團(tuán)隊(duì)在高濃度瓊脂糖凝膠制備及應(yīng)用方面取得新進(jìn)展。研究人員開發(fā)出了一種分離低分子量核酸和蛋白質(zhì)的高濃度瓊脂糖凝膠制備和電泳方法。通過該方法可制備濃度高達(dá)14%的瓊脂糖凝膠，分離相差2-bp或2-nt的DNA片段和實(shí)現(xiàn)植物復(fù)雜蛋白質(zhì)的高分辨率分離。
核酸和蛋白質(zhì)的凝膠分離一直是分子生物學(xué)研究的重要組成，但低/中濃度瓊脂糖凝膠電泳對于低分子量核酸和蛋白質(zhì)的分離達(dá)不到聚丙烯酰胺凝膠（PAGE）的高分辨率。針對這一難題，研究團(tuán)隊(duì)利用高溫高壓制備了充分溶解的高濃度瓊脂糖凝膠（HAG），發(fā)明了一種簡單易操作的灌膠塑料盒灌制黏稠的HAG垂直凝膠，并改進(jìn)了適合小分子量核酸和蛋白高濃度瓊脂糖電泳（HAGE）的緩沖液條件，可有效分離在10-100bp范圍內(nèi)相差2-bp或2-nt的DNA片段，在10-200kDa范圍內(nèi)實(shí)現(xiàn)植物復(fù)雜蛋白質(zhì)的高分辨率分離。
HAGE不僅達(dá)到了可以媲美PAGE的小分子量核酸蛋白分離效果，而且制備過程中也不涉及危險(xiǎn)化學(xué)試劑。更為關(guān)鍵的是，HAGE可以應(yīng)用于一些PAGE較難應(yīng)用的研究，如In-Gel Western blot和蛋白凝膠回收。該方法的建立為植物蛋白質(zhì)分離鑒定等研究提供了技術(shù)支撐。（中熱）
轉(zhuǎn)自：中國食品報(bào)
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